Окраска эозином – метиленовым синим по Райту
Принцип.
Применение специально приготовленного красителя-фиксатора, дающего наиболее четкую окраску зернистости гранулоцитов особенно базофилов.
Посуда и аппаратура.
1. Стеклянные колбы емкостью 250 и 1000 мл.
2. Аппарат Коха.
3. Воронки.
4. Измерительный цилиндр емкостью 500 мл.
5. Штатив для мазков.
6. Мостик для окраски с кюветой.
Реактивы.
Краситель-фиксатор: 1% раствор медицинского метиленового синего на 0,5% водном растворе двууглекислого натрия наливают в сосуд так, чтобы высота слоя не превышала 6 см, и нагревают в аппарате Коха при 100° в течение часа с момента образования пара. Затем жидкость охлаждают и фильтруют. Фильтрат при искусственном освещении в тонком слое должен иметь пурпурно-красный оттенок.
К 100 мл фильтрата прибавляют 500 мл 0,1% водного раствора эозина (желтого, водорастворимого). При смешении обеих жидкостей тотчас же образуется обильный осадок, который отфильтровывают и высушивают. Полученный краситель растворяют в чистом метиловом спирте в соотношении 0,1 : 60.
На сухой нефиксированный мазок наливают несколько капель краски, через 1 минуту прибавляют столько же капель дистиллированной воды. Через 2—3 минуты препарат промывают в воде, пока он в тонком слое не приобретет розоватого оттенка.
Благодаря наличию в краске азура ядра становятся вишнево-красными и выявляется азурофильная зернистость как в лейкоцитах, так и в лимфоцитах; особенно четко выступает зернистость в моноцитах.
|