Эритроцитометрия
(измерение-диаметра эритроцитов)
Унифицированный микроскопический метод с помощью окуляр-микрометра (1972).
Принцип.
Измерение диаметра эритроцитов в окрашенном мазке крови с помощью окуляр-микрометра
Специальное оборудование.
1. Микроскоп.
2. Окуляр-микрометр — окуляр, насаживаемый на тубус микроскопа, с круглой стеклянной пластинкой и нанесенной на ней шкалой, разделенной на 50 делений.
3. Объект-микрометр предметное стекло со шкалой длиной 2 мм, разделенной на 200 делений (каждое деление 10 мкм).
Ход определения.
Перед началом работы определяют цену одного деления шкалы окуляр-микрометра,, которая зависит от длины тубуса микроскопа и увеличения объектива. Определение проводят с помощью объект-микрометра, который устанавливают на столик микроскопа таким образом, чтобы шкалы окуляр-микрометра и объект-микрометра сбвпалн. Затем отсчитывают число делений шкалы окуляр-мик-
рометра, совпадающих с тем или иным количеством делении шкалы объект-микрометра, и определяют цену одного деления. Например: 40 делений шкалы окуляр-микрометра совпади с б делениями объектмикрометра, т. е. соответствуют 60 мкм; одно деление 60/40= 1,5 мкм. Эго определение проводят один раз для определенного микроскопа, с помощью которого в дальнейшем производят эритроцитометрию.
На сухой окрашенный мазок наносят каплю иммерсионного масла, погружают в нее иммерсионный объектив и микроскопируют с максимально освещенным полем зрения.
В тонком месте мазка (где эритроциты расположены изолированно) измеряют, диаметр не менее 100 эритроцитов, отмечая, какое количество делений шкалы окуляр-микрометра укладывается в эритроцит. Отмечают результат измерения каждого эритроцита (удобно пользоваться 11-клавишным счетчиком, условно используя разные клавиши для определенного числа делений шкалы).
Зная цену одного деления и количество эритроцитов с одинаковым числом делений, выражают результат в процентах.
Пример: эритроциты с диаметром
4,5 мкм 5 %,
6 мкм - 10%
7,5 мкм — 70 %,
9 мкм -11 %,
10,5 мкм — 4 %.
Результат можно представить и в виде эритроцитометрической кривой (кривая Прайс-Джонса), при этом на оси абсцисс откладывают диаметр в микронах, а на оси ординат процент эритроцитов. При необходимости результат выражают в виде среднего диаметра эритроцитов (см. 3.3.5).
|