Комбинированная окраска миелина и глиальных волокон

Комбинированная окраска люксоловым прочным синим MBSN и левафиксовым красно-фиолетовым E-2BL миелина и глиальных волокон [Waldrop, Putcher, 1975]

1. Депарафинируют срезы в ксилоле и проводят через абсолютный спирт до 95%-ного спирта.

2. Окрашивают в растворе люксолового прочного синего MBSN в течение ночи при 55—60° (растворяют 1 г красителя в 1 л 95%-ного этанола и добавляют 5 мл 10%- ного раствора уксусной кислоты, перед употреблением профильтровывают; этот раст­вор стабилен).

3. Промывают 95%-ным этанолом для удаления избытка красителя.

Дифференцируют сначала 0,05%-ным раствором LiCO3, а затем . 70%-ным эта­нолом по несколько секунд до тех пор, пока глиальные волокна будут неокра­шенными.

4. Промывают в дистиллированной воде 5 мин.

5. Окрашивают в 0,25%-ном растворе левафиксового красно-фиолетового Е-2В в 0,25%-ной уксусной кислоте 2 ч при 55-60° (краситель добавляют в нагретую кислоту непосредственно перед погружением препаратов; этот раствор нестабилен).

6. Быстро промывают в трех сменах дистиллированной воды, обезвоживают в трех сменах абсолютного этанола, просветляют в ксилоле и заключают в синтетическую среду.

Миелин окрашивается в синий цвет, глиальные волокна, отростки эпендимальных клеток и ядра - в красно-фиолетовый цвет.

Примечание. 1. При комнатной температуре левафиксовый краситель окрашивает менее избирательно многие ткани, имея особое сродство к коллагену. Неселективная окраска уменьшается с повышением температуры.

С увеличением концентрации левафиксового красителя интенсивность окраски глиальных волокон уменьшается, возможно, из-за усиливающейся агрегации кра­сителя.