Окраска по Лейшману.

Окраска по Лейшману.

МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

В состав фиксатора-красителя входит метанол -яд, класс опасности III, особенности действия на организм А, токсичен при ингаляции, контакте с кожными покровами и особенно при проглатывании. Огнеопасен. Концентрация паров метанола в производственных помещениях при использовании и испытании фиксатора-красителя не должна превышать ПДК = 5 мг/м3. Работа с фиксатором красителем должна проводиться в вытяжном шкафу при хорошо действующей вентиляции, в перчатках, вдали от открытого огня.

Меры предосторожности -соблюдение “Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР”, Москва, 1981 г.

При работе с фиксатором-красителем следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита В или любой другой возбудитель вирусной инфекции.

Химическая посуда и оборудование, используемые при работе с фиксатором-красителем, должны быть соответствующим образом маркированы и храниться отдельно. Запрещаются хранение и прием пищи и курение в помещениях, предназначенных для работы с фиксатором-красителем.

ПРИГОТОВЛЕНИЕ МАЗКОВ КРОВИ

Мазки  крови  сделать  на  предметных  стеклах  с  помощью  более  узкого предметного шлифованного стекла следующим образом. Взять предметное стекло за длинные края и прикоснуться его поверхностью, отступив на 0,5 -1 см от узкого края, к капле крови (но не к коже). Предметное стекло следует держать на столе или в левой руке за края. Правой рукой приставить шлифованное стекло узким краем к предметному стеклу с кровью слева от капли под  углом  45°  и  продвинуть  его  вправо  до  соприкосновения  с  каплей  крови. Выждать до тех пор, пока кровь расплывется по всему ребру шлифованного стекла, и затем легким быстрым движением провести его справа налево до тех пор, пока не будет исчерпана вся капля. Капля крови должна быть небольшой и соразмерна так, чтобы весь мазок помещался на предметном стекле, не доходя 1 -1,5 см до его края.

Сильно нажимать на стекло нельзя, так как многие клетки крови могут оказаться поврежденными.  Хорошо  сделанный  мазок  тонок,  имеет  желтоватый  цвет  и оканчивается “метелочкой”. После  приготовления  мазки  следует  быстро  высушить  на  воздухе  до исчезновения  влажного  блеска;  при  медленном  высыхании  может  изменяться морфология клеток. Уложить препараты мазками кверху на стеклянный мостик для окраски.

ПРОВЕДЕНИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ

Непосредственно перед определением разбавить фиксатор-краситель нейтрализованной водой в соотношении 1:2 -1:5. Полученный разбавленный раствор фиксатора-красителя можно хранить в течение 6 часов. На нефиксированные мазки крови налить неразбавленный раствор фиксатора-красителя так, чтобы он покрыл весь мазок. Через 3 мин. смыть фиксатор-краситель нейтрализованной водой и далее красить разбавленным раствором фиксатора-красителя в течение 5 -15 мин. По истечении этого времени препараты промыть нейтрализованной водой, высушить на воздухе и микроскопировать при увеличении 10×100/1,30 или аналогичном.

Окраска форменных элементов крови должна быть следующей:

эритроциты -розовые, розовые с серым или бежевым оттенком, бежево-коричневые;

тромбоциты-розово-фиолетовые или фиолетовые;

ядра лимфоцитов, моноцитов и нейтрофилов -фиолетовые;

цитоплазма лимфоцитов -голубая, серо-голубая или сине-голубая;

цитоплазма моноцитов -серо-голубая;

цитоплазма нейтрофилов -бледно-розовая или розово-серая;

зернистость нейтрофилов -фиолетовая или красно-фиолетовая;

зернистость эозинофилов -оранжево-красная, розово-красная или розово-фиолетовая;

зернистость базофилов -фиолетовая.