Окрашивание жиров и липидов



Термин «липиды» собирательный. Им обозначают все жироподобные вещества, экстрагируемые растворителями жиров (бензин, эфир, хлороформ и др.).

В основе методов окрашивания лежат чисто физические процессы. Суть их заключается в том, что вещества, красящие жиры, хорошо в них растворяются и поэтому легко переходят из раствора в липиды.

Окрашивание Суданом III.

Является наиболее распространенным методом выявления жира.

Приготовление раствора красителя.

В 100 мл горячего 70% спирта засыпают 0,2—0,3 г порошка судана III, несколько раз взбалтывают и ставят в термостат (при58°С) на несколько часов, затем охлаждают и фильтруют.


Метод.

1. Замороженные срезы (из свежей или фиксированной в формалине ткани) на несколько минут переносят из воды в 50% спирт.

2. Помещают в спиртовой раствор красителя на 15—30 мин (бюксы следует закрывать, так как испарение спирта приводит к выпадению осадков красителя).

3. Быстро ополаскивают в 50% спирте.

4. Промывают в дистиллированной воде.

5. Подкрашивают ядра кислым гемалауном.

6. Промывают и заключают в желатин или глицерин-желатин (обезвоживание в спиртах

экстрагирует жиры).

Результат.

Жировые вещества интенсивно оран­жевого цвета, ядра —"синие. Препараты выцветают сравнительно скоро, поэтому откладывать исследование не рекомендуется.

Окраска шарлахом.

Красители:

в смесь из 50мл ацетона и 50 мл 70% спирта засыпают 0,2—0,3 г шарлаха. Хорошо закрывают и взбалтывают. Полученный раствор перед употреблением фильтруют.

Метод.

1. Замороженные срезы из свежей или фиксированной в формалине ткани помещают в 50% спирт на 2—4 мин.

2. Окрашивают в растворе красителя 2—3 мин.

3. Быстро ополаскивают в 70% спирте.

4. Промывают в воде.

5. Подкрашивают ядра кислым гемалауном.

6. Промывают в воде и  заключают в  глицерин  или глицерин-желатин.

Результат. 

Жировые вещества оранжево-красные, ядра—синие.



Яндекс.Метрика