НОВЫЕ КРАСИТЕЛИ, СОДЕРЖАЩИЕ ГАЛЛОЦИАНИН, ДЛЯ ОКРАСКИ ГИСТОЛОГИЧЕСКИХ СРЕЗОВ
Л. А. Фаустов (Чебоксары), А. И. Едемский (Курск)
Кафедра патологической анатомии (зав. — проф. Г. А. Панфилова)
Чувашского университета им. И. Н. Ульянова
Основным недостатком красящих смесей, приготовленных на основе галлоцианина [1, 2], является длительность окраски, составляющая 24—48 ч. Это делает их использование непригодным для быстрой окраски препаратов, например при экспресс-диагностике.
Мы поставили цель сократить время окрашивания, сохранив при этом высокое качество окраски клеточных ядер галлоцианином.
Опытным путем нами было установлено, что водный раствор галлоцианина при дополнительном введении в него уротропина обладает способностью в течение 3—5 мин окрашивать клеточные ядра в срезах, предварительно обработанных в растворе алюмокалиевых квасцов. Это новое свойство красителя проявляется при определенном соотношении ингредиентов в красящем растворе.
Методика окраски следующая. Депарафинированные срезы протравливают в 5 % водном растворе алюмокалиевых квасцов в течение 2 мин, затем промывают водой. В течение 5 мин срезы окрашивают красящим раствором, который готовят путем последовательного растворения в 100 мл дистиллированной воды, 1,5 г уротропина и 0,15 г галлоцианина. Раствор доводят до кипения, остужают и фильтруют через бумажный фильтр. После этого срезы промывают дистиллированной водой, проводят через спирты восходящей концентрации, затем через ксилол и заключают в бальзам.
Результаты окраски: клеточные ядра ярко и чисто окрашиваются в темно-синий цвет, при этом четко выделяются оболочка ядра, хроматин, а также ядрышко.
Достоинством предложенного красителя является высокое качество окраски клеточных ядер и значительное сокращение времени окраски галлоцианином.
Дальнейшие работы с галлоцианином были направлены на разработку на его основе красителя, способного дать результаты окраски, идентичные таковым при окраске гематоксилином и эозином. Нам удалось разработать новый способ окраски с использованием в качестве красителя раствора, в котором совмещены галлоцианин с эозином, путем исключения из прописи хромовых квасцов и дополнительного введения в красящий раствор янтарнокислого натрия и трилона Б. Окраска предлагаемым способом осуществляется с применением одного красящего раствора, что ведет к ликвидации многоэтапности окраски гистологических срезов и упрощению способа. Присутствие в растворе янтарнокислого натрия обусловливает резкое возрастание скорости окрашивания: окраска длится 3—5 мин вместо 24—48 ч при применении известных красящих смесей, содержащих галлоцианин.
Методика окраски данным способом следующая.
Депарафинированные срезы протравливают в 5 % водном растворе алюмокалиевых квасцов в течение 2 мин, затем их промывают водой. В течение 5 мин их окрашивают красящим раствором, который готовят таким образом: в 100 мл дистиллированной воды последовательно растворяют 0,1 г трилона Б, 0,1 г янтарно-кислого натрия, 0,03 г эозина БА и 0,12 г галлоцианина. Раствор нагревают до кипения, затем остужают и фильтруют через бумажный фильтр. После этого срезы промывают дистиллированной водой, проводят через спирты восходящей концентрации, затем через ксилол и заключают в бальзам.
Результаты окраски: ядра клеток окрашиваются в темно-синий цвет, цитоплазма клеток, соединительная ткань, мышцы, эритроциты — в различные оттенки розового цвета. Таким образом, результаты окраски совпадают с таковыми при окраске гематоксилином и эозином.
Существенными достоинствами предлагаемого способа окраски по сравнению с окраской гематоксилином и эозином являются применение вместо импортного гематоксилина более доступного и дешевого галлоцианина, простота, стабильность результатов окраски, сокращение сроков окраски в 10 раз. Кроме того, в предлагаемом способе раствор красителя сразу же готов к употреблению, чем он выгодно отличается от гематоксилина, требующего длительного созревания.
Простота, доступность, экономичность способа, высокое качество окраски гистологических препаратов позволяют рекомендовать его для использования в работе патогистологических лабораторий.
| 
