Применение тетрагидрофурана
в гистологической технике
В. В. Биров (Червоноград)
Патологоанатомическое отделение (зав. В. В. Биров)
Червоноградской медсанчасти (главный врач И. Т. Петров) треста «Червоноградуголь» Львовской области
АРХИВ ПАТОЛОГИИ 1966;28(3):79-80. (Поступила в редакцию 30/IX 1964 г.)
Ряд преимуществ заключения объектов, подлежащих микроскопическому изучению, в парафин способствовал широкому распространению этого метода среди патологогистологов, гистологов и гистохимиков.
Основные требования заключения объектов изложены в работе von Apathy и руководствах по технике гистологического исследования. Важным недостатком заключения в парафин является сморщивание тканей (от 8 до 20% и более), а также довольно длительное время обработки. Недостатком диоксанового метода (Graupner и Weis-berger) является то, что диоксан — яд, сильно действующий на печень и почки, — поступает в организм не только с вдыхаемым воздухом, но и через неповрежденную кожу. Близкий к нему по химической структуре тетрагидрофуран (фуранидин) менее токсичен и в последнее время с успехом применяется в качестве обезвоживающего и просветляющего агента при заключении объектов в парафин (Nultsch; Dahme и Rothemund; Haust, 1958, 1959; Malkinson и Potter). Его основным преимуществом является то, что не требуется промежуточных сред, так как тетрагидрофуран легко смешивается как с водой, так и с расплавленным парафином; сокращаются сроки обработки, что даег возможность применять тетрагидрофуран при срочной биопсии; ткани меньше сморщиваются и сохраняются их тинкториальные свойства. Особо рекомендуется применение тетрагидрофурана при заключении в парафин таких органов, как лимфатические узлы, зобная железа, селезенка, а также грануляционная ткань, или при необходимости срочной биопсии мелких кусочков кожи, соскобов слизистой оболочки матки и кусочков шейки матки (В. В. Биров).
Тетрагидрофуран (фуранидин) при комнатной температуре представляет собой прозрачную жидкость с температурой кипения 65,5°, удельным весом 0,8892. Он легко смешивается с водой, парафином, со многими органическими растворителями. Многие биологические красители в тетрагидрофуране нерастворимы. Легко удаляется из организма, не действует на печень и почки, а также не вызывает контактных и аллергических дерматитов.
Нами разработаны и проверены следующие методики заключения объектов в парафин через тетрагидрофуран.
I. Заключение в парафин соскобов слизистой оболочки полости матки и других мелких объектов для срочной диагностики.
1.Фиксация тканей не более 1 часа в 10% растворе нейтрального забуференного солевого формалина или кальций-формоле по Lillie. Применима любая другая фиксация, но не более 1 часа.
2.Четыре смены тетрагидрофурана по 15 мин. в каждой смене.
3.Две смены парафина при 56° по 30 мин.
4.Заключить в свежий парафин.
5.Резка парафиновых блоков, монтировка, окраска и заключение срезов в канадский бальзам или даммаровую смолу занимают не более 1 часа.
Общее время обработки объекта с фиксацией составляет не более 4 часов.
II. Заключение в парафин кусочков органов и тканей, удаленных при операции.
1.Любая фиксация. Мы применяем нейтральный формалин или кальций-формол по Lillie не более б часов.
2.Тетрагидрофуран — вода (2:1) —30 мин.
3.Две смены тетрагидрофурана по 30 мин., свежая смена 1 — 1 час 30 мин.
4.Две смены парафина при 56° по 1 часу.
5.Заключить в свежий парафин.
Время обработки, включая 6 часов фиксации, не превышает 11 часов.
III. Заключение в парафин секционного материала.
1.Фиксированные органы и ткани тщательно промывают водой и просушивают фильтровальной бумагой.
2.Тетрагидрофуран — вода (2:1) — 1 час.
3.Две смены тетрагидрофурана по 1 часа 30 мин, свежая смена 2 часа.
4.Тетрагидрофуран — парафин (1:1) при 56°— 1 час.
5.Парафин — 2 смены по 2 часа 30 мин при 56°.
6.Заключить в свежий парафин.
Время обработки при фиксации органов и тканей не более 12 часов в кальций-формоле по Lillie составляет 24 часа. Парафиновые блоки хорошо режутся.
Результаты исследований показали, что по сравнению со стандартным методом заключения в парафин при использовании метода тетрагидрофуран — бензол — парафин микроскопические препараты меньше сморщиваются, почти без артефактов и близки к целлоидиновым. Кроме окраски гематоксилин-эозином, мы применяли модифицированные нами методы Маллори — Гейденгайна (В. В. Биров), пентахромовую окраску (Movat), ШИК-реакцию, окраску кислых мукополисахаридов альциановой синей по Lison или Гомори (Gomori), комбинированную окраску по Первозванской, астраблау по Pioch, метахроматическое окрашивание толуидиновой синей и азуром А, триазониевую реакцию по Шубичу, нингидрин-Шифф по Ясума и Ичикава, выявляли триптофан по Adams и всегда получали вполне удовлетворительные результаты.
| 
