ПРИМЕНЕНИЕ ТЕТРАГИДРОФУРАНА В ГИСТОЛОГИЧЕСКОЙ ТЕХНИКЕ


В. В. Биров (Червоноград)

Патологоанатомическое отделение (зав. В. В. Биров)

Червоноградской медсанчасти (главный врач И. Т. Петров) треста «Червоноградуголь» Львовской области

АРХИВ ПАТОЛОГИИ 1966;28(3):79-80. (Поступила в редакцию 30/IX 1964 г.)


Ряд преимуществ заключения объектов, подлежащих микроскопическому изучению, в парафин способствовал широкому распространению этого метода среди патологогистологов, гистологов и гистохимиков.

Основные требования заключения объектов изложены в работе von Apathy и руководствах по технике гистологического исследования. Важным недостатком заключения в парафин является сморщивание тканей (от 8 до 20% и более), а также довольно длительное время обработки. Недостатком диоксанового метода (Graupner и Weis-berger) является то, что диоксан — яд, сильно действующий на печень и почки, — поступает в организм не только с вдыхаемым воздухом, но и через неповрежденную кожу. Близкий к нему по химической структуре тетрагидрофуран (фуранидин) менее токсичен и в последнее время с успехом применяется в качестве обезвоживающего и просветляющего агента при заключении объектов в парафин (Nultsch; Dahme и Rothemund; Haust, 1958, 1959; Malkinson и Potter). Его основным преимуществом является то, что не требуется промежуточных сред, так как тетрагидрофуран легко смешивается как с водой, так и с расплавленным парафином; сокращаются сроки обработки, что даег возможность применять тетрагидрофуран при срочной биопсии; ткани меньше сморщиваются и сохраняются их тинкториальные свойства. Особо рекомендуется применение тетрагидрофурана при заключении в парафин таких органов, как лимфатические узлы, зобная железа, селезенка, а также грануляционная ткань, или при необходимости срочной биопсии мелких кусочков кожи, соскобов слизистой оболочки матки и кусочков шейки матки (В. В. Биров).

Тетрагидрофуран (фуранидин) при комнатной температуре представляет собой прозрачную жидкость с температурой кипения 65,5°, удельным весом 0,8892. Он легко смешивается с водой, парафином, со многими органическими растворителями. Многие биологические красители в тетрагидрофуране нерастворимы. Легко удаляется из организма, не действует на печень и почки, а также не вызывает контактных и аллергических дерматитов.

Нами разработаны и проверены следующие методики заключения объектов в парафин через тетрагидрофуран.


I. Заключение в парафин соскобов слизистой оболочки полости матки и других мелких объектов для срочной диагностики.

1.Фиксация тканей не более 1 часа в 10% растворе нейтрального забуференного солевого формалина или кальций-формоле по Lillie. Применима любая другая фиксация, но не более 1 часа.

2.Четыре смены тетрагидрофурана по 15 мин. в каждой смене.

3.Две смены парафина при 56° по 30 мин.

4.Заключить в свежий парафин.

5.Резка парафиновых блоков, монтировка, окраска и заключение срезов в канадский бальзам или даммаровую смолу занимают не более 1 часа.

Общее время обработки объекта с фиксацией составляет не более 4 часов.


II. Заключение в парафин кусочков органов и тканей, удаленных при операции.

1.Любая фиксация. Мы применяем нейтральный формалин или кальций-формол по Lillie не более б часов.

2.Тетрагидрофуран — вода (2:1) —30 мин.

3.Две смены тетрагидрофурана по 30 мин., свежая смена 1 — 1 час 30 мин.

4.Две смены парафина при 56° по 1 часу.

5.Заключить в свежий парафин.

Время обработки, включая 6 часов фиксации, не превышает 11 часов.


III. Заключение в парафин секционного материала.

1.Фиксированные органы и ткани тщательно промывают водой и просушивают фильтровальной бумагой.

2.Тетрагидрофуран — вода (2:1) — 1 час.

3.Две смены тетрагидрофурана по 1 часа 30 мин, свежая смена 2 часа.

4.Тетрагидрофуран — парафин (1:1) при 56°— 1 час.

5.Парафин — 2 смены по 2 часа 30 мин при 56°.

6.Заключить в свежий парафин.

Время обработки при фиксации органов и тканей не более 12 часов в кальций-формоле по Lillie составляет 24 часа. Парафиновые блоки хорошо режутся.


Результаты исследований показали, что по сравнению со стандартным методом заключения в парафин при использовании метода тетрагидрофуран — бензол — парафин микроскопические препараты меньше сморщиваются, почти без артефактов и близки к целлоидиновым. Кроме окраски гематоксилин-эозином, мы применяли модифицированные нами методы Маллори — Гейденгайна (В. В. Биров), пентахромовую окраску (Movat), ШИК-реакцию, окраску кислых мукополисахаридов альциановой синей по Lison или Гомори (Gomori), комбинированную окраску по Первозванской, астраблау по Pioch, метахроматическое окрашивание толуидиновой синей и азуром А, триазониевую реакцию по Шубичу, нингидрин-Шифф по Ясума и Ичикава, выявляли триптофан по Adams и всегда получали вполне удовлетворительные результаты.



ЛИТЕРАТУРА

Пирс Э. Гистохимия. М., 1962. —

Adams С. М., J. clin. Path., 1957, v. 10, p. 56. —

von Apathy S., Z. wiss. Mirk., 1912, Bd. 29, S. 449.—

Dahme E., Rothe-m u n d L, Zbl. allg. Path., 1955, Bd. 94, S. 14. —

Gomori G., Brit. J. exp. Path., 1954, v. 35, p. 377. —

Graupner H. et al., Zool. Anz., 1931, Bd. 96, S. 204. —

H a u s t M. D., Lab. Invest., 1958, v. 7, p. 58. —

Idem, Am. j. clin. Path., 1959, v. 31, p. 357. —

Hofmann, О e 11 e 1 H., Arch. exp. Path. Pharmak., 1954, Bd. 222, S. 233. —

Lillie R. D., Histopathologic technic and practical Histochemistry. New York, 1954. —

Lison L., Stain Teclmol., 1954, v. 29, p. 131.—

Malkin son F. D., Potter B., Arch. Derm., 1960, v. 82, p. 798. —

Movat H. Z., Arch. Path., 1955, v. 60, p. 289. —

N u 11 s с h W., Wiss. Z. Martm-Luther-Univ., Haile-Wittenberg, 1954, Bd. 4, S. 161. —

Pioch W., Arch. path. Anat., 1957, Bd. 330, S. 337.



THE USE OF TETRAHYDROFURAN IN HISTOLOGICAL TECHNIQUE

V. V. Birov Summary

The use of tetrahydrofuran recommended by a number of authors for dehydration and classification in paraffin mounting of objects possesses a number of advantages over mounting by the standard method through alcohols-benzol. The treatment of objects of investigation is faciliated, the terms are reduced 4—5 times and the artefacts are almost absent due to a lesser tissue contraction; their tinctorial properties are retained and a number of histochemical methods of investigation may be employed.



Яндекс.Метрика
Система Orphus