Фиксация, обработка и окраска материала
при диагностике Бешенства
Весь материал, взятый из ЦНС, а также подчелюстную слюнную железу фиксируют не менее 3-5 суток в смеси Дюбоск-Бразиль-Буэн следующего состава:
40%-ный формальдегид - 125 мл
96%-ный этиловый спирт - 275 мл
Дистиллированная вода - 25 мл
Ледяная уксусная кислота - 30 мл
Пикриновая кислота - 2 мл
После фиксации материал без промывки в воде перекладывают в 96%-ный этиловый спирт на сутки, далее обезвоживают по обычной схеме. Используется заливка только в парафин. Для сохранения архива оставшийся материал переносят в 70%-ный спирт. Указанные фиксация и проводка необходимы для выявления телец Бабеша-Негри.
Окраска на тельца Бабеша-Негри
Наиболее простой и доступный метод - применение краски Романовского-Гимза (4 мл неразведенного красителя на 70 мл дистиллированной воды).
Депарафинированные гистологические срезы окрашиваются 2-3 суток при комнатной температуре.
После быстрой промывки в воде дифференцируются в подкисленном спирте (на 50 мл 96%-ного спирта 1-2 капли уксусной кислоты).
Спирты, ксилол, бальзам.
Возможно приготовление основного раствора красителя по прописи: Азур II - 1 г на 1 л дистиллированной воды.
Эозин натрия - 0,5 г и эозин калия - 0,5 г на 1 л дистиллированной воды.
Для приготовления рабочего раствора прилить к 100 мл натрий-фосфатного буфера с РН - 7,2-7,6 50 мл раствора Азур II, затем добавить небольшими порциями 45 мл раствора эозина.
Рабочий раствор красителя готовят перед употреблением.
Окрашивать от 2 часов до 2 суток.
Порядок дифференцировки и заключения тот же.
Результаты: фон бледно-розовый, нейроны голубые, тельца Негри от розового до красного цвета с базофильными включениями.
| 
