Изготовление ацетокарминовых препаратов

слюнных желез Хирономуса


ХИРОНОМУС:

Личинку помещают на предметное стекло в каплю воды, находят головной конец (задний отдел имеет три продолговатых выроста, выпол­няющих опорную функцию при движении личинки).

Иглой отчленяют головной сегмент и осторожно выдавливают в воду содержимое первых трех-четырех сегментов личинки, в которых распо­ложены две прозрачные, студенистые гранулированные железы.

Выделенные железы сразу помещают в каплю красителя, который наливается в часовое стекло, предметное стекло с лункой или в лунки на по­верхности парафина. Время окрашивания варьирует от 30 мин до 1 часа при комнатной температуре, при 37 °С - время сокращается до 30 мин.

После окрашивания слюнных желез их помещают в каплю 45%-ной уксусной кислоты на предметное стекло или в каплю насыщенного раствора хлоралгидрата в воде на 5 мин для частичной дифференцировки хромосом и цитоплазмы.

Среды заменяются на свежую каплю 45%-ной уксусной кислоты. Материал осторожно накрывают покровным стеклом. Под слоем фильтровальной полоски удаляется избыток уксусной кислоты (не сдвигать покровное стекло).




Приготовление ацетокармина.

Приготовление ацетокармина. 1 г кармина растворяют в 100 мл 45%- ной уксусной кислоты (45 мл ледяной уксусной кислоты и 55 мл дистиллированной воды) в течение трех часов. Растворение ведут в колбе на водяной бане с обратным холодильником или на медленном огне, стараясь не кипятить, а всякий раз перед закипанием снимать колбу с раствором с огня.

Остывший раствор фильтруют и помещают в посуду с притертой крышкой.





Яндекс.Метрика